四、育珠植片(核)操作手术
(一)手术季节
一般四季均可进行适宜水温为10-30℃尤以18-25℃最佳即3-6月。
(二)插核季节与珍珠囊形成速度的关系
1、春季和初冬水温13-15℃插核珍珠囊形成需要25-30天有机质的分泌形成约为1个月珍珠质的沉积则需40-45天。
2、秋季水温18-20℃时珍珠囊形成速度需18-25天有机质包住需25天珍珠质沉积需1个月左右。
3、初夏水温18-20℃时珍珠囊形成需20-30天有机质被包需一个月珍珠质沉积需40天以上。
4、秋季水温22-25℃时珍珠囊形成需15-20天有机质被包需20天珍珠质沉积需25天。
5、夏季水温30-35℃时珍珠囊的形成和开始沉积珍珠质的速度比任何季节都快一般插核后一个月左右纯化的霰石结晶包被在珍珠核上。
(三)手术蚌
1、蚌种 通常各种河蚌都可用作育珠蚌。但从手术操作及产蚌的质与量考虑目前以三角帆蚌和褶纹冠蚌作为主要的育珠蚌种。
2、规格 制片应选择2-3龄的年轻壮健蚌。育珠蚌可选择2-4龄的壮健蚌。育有核珍珠的育珠蚌应选择体长在14公分以上的壮健蚌。
3、素质标准 外形完正壳色鲜艳生长曲线间距较宽提离水面时喷水力强闭壳肌有弹力(1斤/平方厘米以上)内无寄生虫肠道充盈晶杆体粗壮等为壮健蚌的标志。
(四)手术工具
制片有开壳刀、剪刀、镊子、切片刀、玻板、盛水盆、滴药瓶、毛巾等。插片有开壳器、固定塞、开创针、送片针、压鳃板、手术刀等。有核珠工具还有通道针送核器等。再生珠工具尚有顶叉针、挖珠针等。对于在外套膜上开创、送片时的送核工具要依据育珠蚌的不同规格选用不同尺码的开创针号这是确保优质珍珠的重要关键。
(五)术前暂养
是指对准备施行手术的蚌进行术前强化培育。方法是将蚌放入肥而爽的水体中吊养以增强蚌体素质提高手术成活率和成珠速率。暂养时间按水温、水文条件酌定。
(六)无核珍珠的操作手术
1、制片 从制片蚌外套膜的边缘膜上剥取外表皮组织切制成细胞小片。手术程序:剖蚌→分膜→取小片条→切成小片。小片的厚薄、大小、形状与珍珠质量密切相关尤其关系到成珠的速度和珠形。
2、制片方法和珍珠质量的关系
(1)小片离体时间短好 制成的小片应尽快插入育珠蚌外套膜结缔组织内不要长时间的搁置。离体时间越短活力越强形成珍珠囊也越快分泌机能越强珍珠沉积量越多珠粒大产量高(表1)
(2)制片蚌和插片蚌年龄较轻好(表2)
(3)小片形状以正方形好(表3)
(4)小片的大小:片小圆率高片大圆率低(表4)
(5)片厚薄以0.8毫米适宜(表5)
(6)后端片长珠快于前端片(表6)
表1 小片离体时间与成珠情况

手术时间 离体时间 采珠时间 成珠情况

1967年3月 切片后立即插入 1968年11月 珠粒黄豆大

同上 1小时后插入 同上 珠粒芝麻大

表2 制片蚌和插片蚌年龄与成珠关系(南通县)

组号 手 术 时 间 插片蚌年龄 制片蚌年龄 检查时间 成珠情况 收珠时间及质量1972.11.10

1 1970.10.31 9 8 1971.3.31 未成珠囊 光泽好颗粒小

2 1970.10.31 6 9 1971.3.31 未成珠囊 不规则颗粒小

3 1970.10.31 8 6 1971.3.31 成珠 颗粒大光泽好

表3 小片形状与成珠关系

插片蚌编号 小 片 形状 成珠情况

1 三角形4-6mm 不规则，连珠多

2 正方形4-6mm 质量好，形状规则

3 长方形7-8mm 棒状

4 圆形 粟粒珠多

5 缺刻不齐 粟粒珠、连珠多

表4 片大小与成珠关系

编号 片大小 成珠情况

1 3-4mm 颗粒小，圆形珠多，工艺珠达85%

2 4-6mm 颗料大，圆或椎圆形，工艺珠70%

3 7-8mm 颗粒大，棒状，不规则多，工艺珠50%

4 约10mm 粒大，棒形，有部分烂片、或空心，工艺珠30%

表5 小片厚度与珍珠质量的关系

编号 小片厚度（mm) 成珠情况

1 不分剥 绝大部分烂片，个别形成有机质珠

2 1 以上 半光珠，不规则珠多，颗粒大

3 0.8 珠光好，圆形珠多，珠粒大

4 小于0.5 珠光差，瘪谷形，颗粒小

表6 取片部位与珍珠质量的关系

取片部位(由后向前) 1 2 3 4 5 6

珍珠平均重量(毫克) 37.1 33.4 32.9 28.3 29.2 18.7

产量中所占比例(%) 100 90 88 76 79 50

3、保养 是离体小片生存的必须条件也是人工调控成珠速度和珠色的重要环节。据日本堀口1987年的资料统计用合理的保养液处理小片可提高成珠速率20%以上。目前国内也较重视小片的保养措施所用的保养液品种繁多如:金霉素、青霉素、氯霉素、胰岛素、卵磷脂、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、氯化钴、氯化镁、氯化锰、亲鱼康、磁化水、活化水、葡萄糖酸钙等等。对每种保养液的作用和效果现虽有所了解但如何作出正确的评估仍需进一步研究。
4、植片 把制好的细胞小片插送到育珠蚌的外套膜结缔组织中。方法分直插和横插两种二者在效果上差异并不明显但目前国内广泛采用横插方法。手术程序:排蚌→开壳→加塞→洗膜→植片。
(1)数量 视蚌体大小而定一般每只蚌植40片左右14-16厘米蚌可植50片左右(表7)。
表 7 植片数与成珠关系

植片数量 5片 40片 100片

结果 黄豆大 黄豆大 比芝麻略大绉纹多

养殖时间 二年 二年 二年

(2)部位 以中、后端为好易形成饱满优质珠(表8)。但应注意中央膜背部有条动脉线应避免触及。
表8 三角帆蚌和褶纹冠蚌植片部位珠质比较

珠质部位蚌种 优质珍珠 扁形珍珠 不规则形 等外珠 分粒珠

三 角 帆 蚌 中部 前部 内部 前部 前部、内部

褶 纹 冠 蚌 后端外中部的 前部 内部 中部、前部
外缘部

5、种间的小片异植 是提高不同蚌种资源的利用及调节珠质的一项有效措施。据近期生产和实验结果表明种间的小片异植育珠技术在某种程度上具有一定的实用价值。
6、如何提高插珠小片的质量
(1)制片蚌要选择体质健壮、代谢机能旺盛、年轻无病的河蚌因为珍珠形成主要靠小片形成珍珠囊不断分泌珍珠质(液)日久沉积成珍珠。而育珠手术蚌只不过是珍珠囊存活的外界环境条件如果小片生命力较弱容易被手术蚌摒弃小片的结缔组织很难与手术蚌的结缔组织愈合更不可能增殖成优良的珍珠囊并影响珍珠的产量和质量(小片和手术蚌是寄生物和宿主的关系)当然手术蚌较年轻和健壮也是有利促进珍珠生长的。
(2)小片要有一定厚度日本育珠细胞小片的厚度比中国厚3-5倍厚片具有活力强插进后不易变形和皱缩有利提高珍珠的圆度和光滑度。凡薄片插入后易拉长卷缩成一团活力差所以形成的珍珠长形(米形)多皱纹也多但小片过厚又会影响珍珠的光泽所以小片厚度要适当(4龄左右的成蚌一般在0.8毫米左右为好)这样即有利于小片和手术蚌两者结缔组织的愈合成统一体缩短小片插植后的渗透营养期及时从手术蚌得到营养补充促进珍珠的形成和质量的提高。
(3)操作时注意不损伤细胞小片在用海绵擦洗和摄子操作时易碰伤珍珠基质分泌细胞降低小片分泌珍珠质的能力小片珍珠细胞脱落的部分可能形成白带珠、环纹珠降低珍珠品质所以要轻轻擦洗最好不擦洗。
(4)处理细胞小片不要用清水因为清水渗透压比河蚌血液的渗透压低低渗水进入河蚌血液中使河蚌血球细胞吸水膨胀有损于河蚌细胞生命活性。所以要求使用(抗菌素)金霉素(0.1%)药液既有抗菌作用又能使小片处于平衡渗透的环境不损细胞活力。亦可采用1-2%氯化钴液体和25%珍钴液除上述作用外尚有一定的促长和增光作用。
(5)保持小片的一定形状和规格细胞小片形状一般应采用略正方形规格为0.3厘米×0.5厘米或0.4厘米×0.6厘米(三角帆蚌)和0.6厘米×0.8厘米-1厘米(褶纹冠蚌)。
(6)防止细胞小片污染(指用水、工具、毛巾等育珠工具)和细胞小片干死(不要在太阳下曝晒)和风吹、柴火的烟熏因这些都会影响小片生命力。
7、无核珍珠形成的整个过程分7个时期:
(1)伤口愈合期:插片后伤口愈合与水温有关水温在10℃以上需15天水温在20℃以上需5-7天。
(2)囊袋形成期:在水温15-20℃养殖10天小片与育珠蚌外套膜融为一体成袋状小片中心稍有发硬后。
(3)珠胚形成期:在水温15-20℃条件下经一个月养殖就形成薄片状珠胚。
(4)珍珠形成期:养殖5-7个月育珠蚌就形成不规则的珍珠。
(5)珍珠增厚期:育珠蚌养殖一夏一冬后随着气温上升珍珠质分泌旺盛层层相叠使珍珠层厚度增加并变得光滑。
(6)珍珠成圆期:育珠蚌经2个夏天养殖即至第二年10月份珍珠已成圆状表面显得光滑色泽较好。此时可采收珍珠若三角帆蚌珍珠生长较慢应再养一年采收。
(7)珍珠衰老期:育珠蚌不及时采收分泌机能衰退分泌棱柱质增加珍珠表面显得日益没有光泽影响珠质。育珠蚌的养殖年限一般2-4年。
8、如何提高珍珠圆整度
(1)小片规格:小片大小不仅与珍珠产量有关而且与珍珠圆度有关片越小形成的珍珠越圆但过小对珍珠产量有影响一般以小片每边0.5厘米左右的正方形为宜。插入小片时送片针要放在片子正中心使小片包褒成袋状一次送入至母蚌的外套膜结缔组织中去。所以插送小片要稳、准、快送入后略加整圆育出的珍珠就较圆。
(2)整圆手术:送片后是否进行整圆手术直接影响珍珠圆度。如送片后施行整圆手术形成的珍珠绝大部分较圆;而未施行整圆手术所形成的珍珠其形状不一一般为棒状。整圆手术即送片后用整圆器或钩针或送片针的圆头在伤口外面将小片周围整理成鼓状突起。
(3)手术工具:要求送小片针的针头最好呈圆头状无小刺针头大小要与小片大小相适应。
(4)养殖时间:养殖一年的珍珠大部分呈棒状或片状珍珠体积也不大养殖两年的珍珠大部分呈圆形养殖时间越长珍珠越圆。因此珍珠母蚌一般需经养殖2-3年才可采收珍珠。
9、如何提高褶纹冠蚌的珍珠质量
(1)选择优良的褶纹冠蚌作为育珠蚌要求壳呈黄褐色、淡黄色、淡青绿色蚌体完整无损年龄2-4龄。选作片蚌的育珠蚌要年轻于插送小片的手术蚌。
(2)采用通剥法制取细胞小片使细胞小片不过薄过厚保持0.6-0.9毫米厚度带有少量结缔组织。决不允许使用手指手术工具等损伤细胞小片影响细胞活力。外表皮在切片前先要在药液中浸洗片刻然后切成细胞小片防止乳白色粘液过多造成烂片。细胞小片大小要适中不要过薄的大片要求稍薄的中片一般大小为0.6厘米×0.8厘米、0.7厘米×0.9厘米。
(3)要提高珍珠的产量和质量除保证育珠蚌的营养外插送小片的数量要适宜一般为40-50片具体要根据蚌体的大小而定。
(4)插植小片伤口要适宜不过大过浅、过深使小片插送后长成圆形即可略加整圆否则造成吐片、露片、脱片以及小片折叠等不正常现象。
(5)养殖的水域环境要求微碱性水质肥采用稀养(每亩吊养500只)浅吊(离水面33厘米)定期施肥施肥量按水质肥度而定无机肥、有机肥相结合有条件的可以适当给食(即泼一些豆浆)复壮育珠蚌。
10、育蚌中会出现哪些异常现象及如何防止
(1)烂片:小片送进外套膜的结缔组织后不生成珍珠完全溃烂成脓水物似发臭的浆糊色淡黄。这是由于刀、剪、镊子触压小片和重擦小片而使小片受伤不注意用水卫生引起的细菌感染小片太厚太大小片干死和乳白色粘液过多等原因而引起的。其中主要是由于小片干死和擦伤从而失去分泌机能引起溃烂防止烂片要注意轻制备、轻擦洗小片在高温季节要不断滴注清水于小片上以保持小片的分泌机能。
(2)焦头珠:半粒珠裸露在外套膜的内表皮外似烧焦呈黑色另半粒珠在结缔组织中未暴露部分有光泽这种现象称“焦头珠”。原因是由于手术时送小片太浅半片在伤口外;或伤口过大养殖后一半小片随水流裸露在外。防止焦头珠只要注意小片送得深一些(约0.7厘米深)伤口开得小一点即可。
(3)附壳珠:生长在壳内层上的珍珠称附壳珠。这主要由于插送小片手术不熟练或蚌体太瘦把小片送到外套膜的外表皮层外也可能是由于水域贫瘠养殖过程中营养不良;或小片过大磨破母蚌外套膜外表皮层至蚌壳而生成附壳珠。防止形成附壳珠要注意轻轻地把小片插送至外套膜内外表皮层之间的结缔组织中。如水质瘦瘠则应适当施一些人畜粪肥。
(4)烂核珠:外观虽包有珍珠层具一定光泽粗看如珍珠但在珍珠质内部却都是有臭味的豆渣状物称为烂核珠。这主要由于擦洗小片时过重使小片细胞大部分已坏死;另外插送小片时正反面弄错会使带有结缔组织肌纤维的内表皮层包在里面腐烂而成烂核珠。防止烂核珠要注意轻轻擦洗小片以保持小片的生命力送片时注意不要把片正反面倒置。
(5)骨珠:形成的珍珠全部或部分如骨头状无光泽称为骨珠或半光珠。产生的原因主要是在制备小片时未剪净一条游离的色线特别是褶纹冠蚌的色线条纹较宽如未剪净那更易产生骨珠其次是由于小片太厚太老留有很多的结缔组织和粘液致使生长骨珠。防止形成骨珠要求制备的小片保证质量切净外套膜缘游离端的色线剥净结缔组织。
(6)乌珠:含有泥沙等杂质的珍珠叫乌珠或泥珠。从外观上看珠质内发黑乌珠的形成主要是由于操作时用水不卫生和工具不干净小片未洗净或伤口过大泥水等污物流进伤口污染小片而形成。所以在手术操作过程中一定要注意用水卫生工具干净蚌体清洁。珍珠母蚌在伤口未愈合前最好暂养在清澈的水域中以防污物流入伤口产生乌珠。待伤口愈合后可适当施些有机肥料或再养殖在水质较肥的水域中。
(7)暗光珠:珠面虽有珠光但色暗淡迟钝无商品价值。可能是和水生植物混养在一起或池水缺乏氧气引起。水生植物新陈代谢之后根须大量沉积河底。或鱼蚌的排泄物大量沉积河底经细菌腐烂放出硫化氢渗入珍珠层致使珍珠光泽暗淡无色。
11、鱼类与珍珠蚌混养的方法及经济效益
(1)以草、鳊为主混养育珠蚌。一般每亩产500公斤左右的鱼塘可吊养育珠蚌200只采珠0.5-0.7公斤。亩产300-400公斤的鱼塘可以养殖育珠蚌300-400只采珠1-1.5公斤。
(2)以育珠蚌为主混养鱼类:每亩吊养育珠蚌500-800只鱼产量为150公斤左右每亩水面鱼珠产值可达2000-3000元。
(3)以鲢鳙鱼为主的鱼搪混养育珠蚌:一般每亩水面只能混养育珠蚌100只左右。
鱼蚌混养可充分发挥池塘的生产潜力达到鱼珠双丰收。江苏省吴县车坊乡澄墩村渔场有养殖水面300亩1987年单养鱼的亩均产值是1366.60元;1988年起采用鱼蚌混养亩均产值达至1866.60元;1989年达2149.00元。由此可见池塘养蚌不仅可培育出优质珍珠而且相对地提高了鱼产量。
(七)有核珍珠的操作手术
1、蚌种 以三角帆蚌为主。
2、规格 一般选择5-8龄的蚌较好。制片蚌的适宜体长规格是10-15厘米;育珠蚌的体长15-20厘米较好。
3、素质标准 同无核珍珠。
4、手术前准备工作
(1)工具 见无核珠部分。
(2)珠核 以贝壳为主也可用石腊、塑料、石子、金属、玻璃等。贝壳:一般取用背瘤丽蚌、佛耳丽蚌的壳作原料。塑料珠粒因取材方便所以也较常用但产出的珠粒较轻经济价值稍差。
(3)制备 正圆形的珠核分大、中、小三种规格。贝壳制备程序:切胚→归方→打角→研磨→除色→漂白→抛光。石腊制备珠核先加热溶解再滴入酒清中形成。
(4)漂白 一般用过氧化钠(Na2O2)双级漂白反应过程维持弱碱性。
(5）制光 在热酸中进行提高制光效果。
(6)洗涤 用1-1.5%皂水浸渍搅拌20-30分钟再用冷水反复冲洗至PH7止。
(7)消毒 可在沸水中处理3分钟或在70-80℃热水中浸30分钟。
(8)珠核的特殊处理 有着色处理等。近年还有磁化珠核、活化珠核、荧光珠核等。
5、细胞小片的制备和保养
(1)制片 方法同无核珍珠但基质要适当加厚些。
(2)规格 为珠核径的1/3或核表面积的1/8-1/10一般取2毫米左右过大易产尾巴珠和污珠。片形有方形长方形和三角形之分以方形为好。
(3)保养 保养液同无核珍珠。
6、植核数量和部位
（1）数量 视蚌种、规格而定。一般15-25公分体长的三角帆蚌最多植20粒左右其中两侧外套膜各植6-8粒内脏团植2-4粒。
(2)部位 是决定植核成败的重要关键之一。外套膜的边缘膜区是植入中、小核的部位核径4-6毫米左右其中以后半部尤为适宜。外套膜的中央膜区亦相同。内脏团中的性腺侧区是可植大核的部位核径8-10毫米左右。
7、植核操作手术
(1)季节 以秋季较为适宜此时性腺尚处稳定期有利于作业。
(2)送核 把手术蚌开好壳口放置在手术台上用拨鳃板使鳃和内脏团贴在另一侧蘸水清洗送核部位。用开口针开口再用通道针向伤口伸入通道。通道长要求1厘米以上以便送核。送核时一手持钩钩破外套膜表皮轻微拉起伤口使之成裂孔一手持送核器蘸水把核吸上并嵌入伤口。送核器退出后用通道针将核由通道口推至通道底核离伤口不得小于1厘米否则核会逸出。
(3)贴片 核被固定后用送片针挑起小片由伤口通道送到核的上方送核手术完成。
以上手术过程为核先放手术此外还有核后放手术;核、片同放手术和滚核推片手术。目前生产上常用且效果较好的为核、片同放手术。
(4)固核 主要防止移植的珠核在创口未愈合前从通道中脱出。固核方法较多通常用的有倒膜法倒放法、平放法等等。
8、有核珠手术注意事项
(1)细小片严格控制在2毫米以内否则易出尾巴珠、污珠、皱纹珠等。
(2)育珠蚌个体要在5-8龄10-15厘米。幼龄蚌个体小肉薄不易手术且手术后易穿袋留核率低或附壳珠多。
(3)伤口的大小和通道的宽度要与核的直径相适应小片方能平正地紧贴于核面。
(4)小片正面(紧贴蚌壳的一面)一定要平正地紧贴珠核面。
(八)象形珍珠操作手术
1、附壳象形珍珠
(1)模胚 先用贝壳、石腊等制成定型模胚再经漂白、抛光、洗涤、消毒处理而成。
(2)制片 取模胚1/15或1/2大小的小片贴附模胚后同时移植外套膜结缔组织中。
(3)固模 用倒膜法。
(九)手术蚌的休复
1、休复环境 要求水质清新有微流水条件水面2-5亩水深1.5米以上透明度25-30公分PH6-9无生物敌害的环境。
2、休复后蚌体素质鉴定指标同术前蚌。
3、休复期限一般经12-15天创口已基本愈合蚌体得到恢复即可移至育珠水域进行培育。